Madurez Nuclear: Técnica de Azul de Anhilina

El núcleo espermático esta formado por ADN y proteínas nucleares. Estas proteínas nucleares tienen: funciónestructural (compactación del ADN) y enzimática(reparación). Aparentemente, la estructura y/o composición de la cromatina en el núcleo de los espermatozoides humanos puede ser muy variable, como son otras características del semen (concentración, movilidad,morfología).

 

icarito (zoides)El núcleo espermático de los mamíferos adquiere una alta condensación durante las últimas etapas de la espermatogénesis. Las proteínas nucleares son importantes en la condensación de la cromatina espermática y en la activación del genoma paterno en el huevo fertilizado.

 

El estado de condensación nuclear es la consecuencia del reemplazo de las proteínas nucleares: “histonas” por proteínas mas básicas: “protaminas”; estas últimas se caracterizan por su alto contenido de arginina y cisteina. La función principal de las protaminas es empaquetar el ADN en una cromatina muy condensada, proporcionando al núcleo espermático una extraordinaria estabilidad mecánica y química.

 

Repetidos trabajos muestran la relación entre cromatina anormal e infertilidad masculina(1,2,3). Se ha observado que espermatozoides vivos con cromatina anormal, tienen una capacidad de fertilización disminuída. Además, si estos espermatozoides fertilizan un ovocito, el desarrollo embrionario podría ser anormal(4). La falla en la condensación de la cromatina espermática se debería a un factor exógeno aun desconocido(4).

 

La Técnica de Azul de Anilina (A.A.) se usa para detectar defectos de la cromatina nuclear relacionadas con el contenido nucleo-proteico asociado con el ADN. En este test se evalúa el % de núcleos espermáticos maduros ricos en protaminas que le dan al núcleo una gran estabilidad mecánica y química.

Valor de referencia: > 70 % núcleo maduros y estables.

 

BIBLIOGRAFÍA:
1) Dadoune, JP, Msayyaux, M J and Guihard – Moscato, M L (1998) Correlation between defectos in cromatin condensation of human spermatozoa stained by aniline blue and semen characteristics, Andrología 20,211- 217.

2) De Yi Liu, HN Gordon Baker (1992) Sperm.nuclear chromatin normality : relationship with Sperm morphology, sperm – zona pellucida binding and fertilization rate in vitro Fertil Steril 58: 6,1178 – 1184.

3) J Auger, M Mesbala, C Huber, and JP Dadoune (1990) Aniline bleu staining as a marker of sperm chromatin defects associated with different semen chatacteristics discriminates between proven fertil and suspected infertile men Int J of Androl, 13, 452 – 462.

4) M Schiliaker, V Schnulle, L Schneppel, Vi Vorob and Wienge (1994) Disturbances of nuclear condensation in human spermatozoa: Search for mutations in the genes for protamine 1, protamine 2, and transition protein 1 Human Reprod 9: 12, 2313 – 2317.